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灵芝三萜类化合物对AD模型大鼠脑组织保护作用的研究

[收录:2011-05-16] [作者:] [服务:论文代写代发] [字体: ]
内容摘要:              作者:黄勇攀,刘丙进,喻南慧,刘鲜林,孔祥林,罗俊
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               作者:黄勇攀,刘丙进,喻南慧,刘鲜林,孔祥林,罗俊

【摘要】     目?#27169;?观察灵芝三萜类化合物(GLT)对AD模型大鼠海马组织形态的影响。方法: 70只大鼠随机?#27835;?#29983;理盐水组,假?#36136;?#32452;,模型组,溶媒组,GLT低、中、高剂量组;除生理盐水组和假?#36136;?#32452;外,其余各组大鼠单侧海马内一次性注射Aβ25-35制作AD大鼠模型,术后生理盐水组、假?#36136;?#32452;、模型组大鼠分别灌胃生理盐水,溶媒组灌胃食用油,GLT各组分别灌胃低、中、高剂量的GLT20 d,然后采用透射电镜观察海马神经元的超微结构变化。结果: GLT能明显改善模型大鼠脑组织海马CA1区神经元的退行性变化。结论: GLT能改善大鼠海马CA1区神经元的退行性变化。

【关键词】   灵芝属; 阿尔茨海默病; 海马; 丙二醛; 显微?#23548;?#26597;, 电子 ,扫锚透射; 大鼠,Sprague-Dawley

  [Abstract]Objective: To observe the protective effects of triterpenoids from Ganoderma lucidum (GLT) on the modality of hippocampus tissue of Alzheimer disease (AD) model rats.Methods: AD rats induced by injection of Aβ25-35 into one side of hippocampus were treated with GLT orally for 20 days and then ultrastructural changes of neurons were observed under transmission electron microscope.Results: The modality of hippocampus CA1 region neurons of GLT treated AD rats was distinctly improved when compared with that of the model rats that did not receive GLT treatment.Conclusion: GLT can improve recessively changed neurons in hippocampus CA1 region.

  [Key words] Gardenia; Alzheimer disease; hippocampus; malondialdehyde; microscopy,electron,scaning transmission; rats,sprague-dawley

    阿尔茨海默病(Alzheimer disease ,AD) 是一种渐进性神经退行性疾病,其病理改变为大脑皮质萎缩,皮质神经元减少,大脑皮质和海马中可见大量神经元纤维缠结(NFT)和老年斑(SP),即脂褐素。AD临床表?#27835;?#36817;期记忆力降低,继而表现?#20013;?#24615;智能衰退、运动障碍等。据研究发现脑内胆碱能传递功能紊乱、自由基损伤、β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积、神经元凋亡等因素可能在AD的发病机制中起关键性作用。Aβ沉积是AD发病过程中的关键性因素之一已基本得到了公认。GLT存在于赤芝子实体和孢子粉中,有抗氧化、抗衰?#31995;?#33647;理作用[1],本实验采用形态学方法,?#25945;諫LT对Aβ25-35所致AD大鼠的防治作用及机制,为临床 治疗 AD提供依据。

  1  材料和方法

  1.1  实验材料 

  SD大鼠,雄性,体重(280±20)g由贵阳医学院实验动物中心提供,合格证号SCXK(黔)2002-50001。Aβ25-35(β-5amyloid25-35)购自Sigma公司;DYT2E脑立体定位仪购自天津医疗器械研究所。灵芝三萜类化合物(GLT,由中科院地球化学所提供)用食用油配制?#19978;?#24212;浓度,常温保存。健脑胶囊是青岛国风药业股份有限公司产品。

  1.2 方法  

  70只大鼠随机?#27835;?组,生理盐水组(生理盐水10 ml/kg)、假?#36136;?#32452;(生理盐水10 ml/kg)、模型组(生理盐水10 ml/kg)、GLT低、中、高剂量组(0.25 g/kg、0.5 g/kg、1.0 g/kg),溶媒组(食用油10 ml/kg)。 参考 Sharma等[2]的方法,大鼠经 10%水合氯醛(0.3 g/kg) 腹腔注射麻醉后固定于大鼠脑立体定位仪上,侧脑室注射进针坐标为:前囟后3.5mm,中线左侧2 mm,自颅骨表面深3 mm。除假?#36136;?#32452;和生理盐水组外,其余各组动物均微?#23380;?#23556;2 μl  Aβ25-35缓慢注入,留针5 min;生理盐水组注入等体积无菌生理盐水,假?#36136;?#32452;钻开颅骨后即缝合伤口。各组动物术后常规注射阿奇霉素连续3 d。术后次日按?#40092;?#21058;量灌胃给药,每日1次,连续20 d。

  1.3 大鼠海马CAI区锥体细胞超微结构 

  实验结束后取大鼠,切开皮肤,钝性分离,?#19994;?#21452;侧的颈总动脉,一侧插管,一侧结扎,并剪开一侧的颈外静脉以利于回流,先灌注生理盐水,再灌注戊二醛固定?#28023;?#22266;定1 h后取脑。取海马CA1区组织1 mm3,1%锇酸后固定,环氧树脂包埋,超薄切片,醋酸铀、枸橼酸铅染色,H-600型透射电镜观察、摄片。对切片海马CA1区随机选取若干铜网观察,每只铜网在海马CA1区锥体细胞区域摄片[3]。

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